编者按：近年来，斑马鱼Crispant技术代表了基因编辑领域的重要进展，其高效性、低成本及便捷性，使其成为研究疾病机制、药物筛选及功能基因组学的理想工具，未来将在精准治疗中展现更大的潜力。Crispant技术是通过CRISPR/Cas9技术，将Cas9蛋白与靶点gRNA混合（形成RNP），注射至斑马鱼1细胞期，从而获得F0代敲除的嵌合体斑马鱼（整体敲降），进一步用于表型观察及基因功能研究。

Crispant技术的优势：相较于m啡啉介导的基因敲降技术，Crispant技术具备以下显著优势：

01、研究周期短：最快可在2周内观察胚胎期表型，并可在4周内提供包括靶点效率验证的完整研究报告。

02、观察时间灵活：Crispant技术允许在斑马鱼的任何发展阶段观察表型，而m啡啉的作用随着胚胎发展而减弱，一般仅适用于1周内的观察。

03、低毒副作用：m啡啉可能引发毒副作用，导致非目标基因的表型出现（如p53信号激活），通常需要合成两条m啡啉进行互证，增加了成本。而Crispant技术在同一次设计中能够筛选出多个高效且特异的靶点，多个靶点共同注射时可实现完整的基因敲除效果。

04、可同时敲降多个基因：Crispant技术能够针对多个目标基因进行敲降，避免了同时使用两个m啡啉可能引发的斑马鱼胚胎致死或非特异性表型问题。

05、便于稳定品系构建：Crispant技术筛选出的靶点能够直接用于构建稳定的基因敲除斑马鱼品系，节省了构建时间和费用。

应用场景：Crispant技术的多重sgRNA协同编辑和F0代表型直接筛选，能够将基因功能研究周期压缩至传统方法的1/5，且成本降低超过50%。其高效性、低成本及易操作性使其成为疾病模型建立、基因功能解析及药物筛选的理想选择。

01、疾病模型构建：已有研究利用此技术构建癫痫模型，通过敲除irf2bpl或cars2基因以模拟患者的抽搐表型，从而进行抗癫痫药物的筛选，例如验证丙戊酸。同时，此技术也被应用于凝血障碍模型的构建，敲除adcyap1b基因可导致凝血因子下调，表现为自发性出血，适合用于抗血栓药物评估。

02、基因功能解析：已有研究通过敲除kctd10基因以诱导心脏线性畸形，用于心脏发育研究；同时，rfx6基因的敲除可诱发糖尿病样表型，助力于胰腺功能的研究。

03、药物筛选：已有清晰研究通过敲除斑马鱼模型中的cars2、Sigirr及cbsb基因等诱导相关表型，为神经系统疾病、抗感染与免疫调节、代谢与罕见病以及肿瘤个性化等方面的药物筛选提供了有力支持。

作为健康美丽产业的CRO服务开拓者及斑马鱼生物技术的全球领导者，尊龙凯时致力于建立“斑马鱼、类器官、哺乳动物、人体”的多维生物技术服务体系，并凭借10余年的斑马鱼基因编辑技术经验，具有短周期、高效、直观及大规模产卵等优点，能够为各种科研需求提供流程化、体系化及模块化的斑马鱼Crispant技术服务，欢迎有需求的读者与我们联系！